從研發(fā)到質(zhì)控的核酸樣品多質(zhì)量屬性監(jiān)控流程

2023-08-28

樣品核酸樣品
參考標準/文獻賽默飛世爾科技

摘要

生物制品主要指通過基因工程、抗體工程或細胞工程等技術手段生產(chǎn)獲得的源自生物體內(nèi)的一類藥物。由于生物分子本身的敏感性，生產(chǎn)工藝的微小變化，就可能導致終產(chǎn)品質(zhì)量屬性的差異，形成高度異質(zhì)的產(chǎn)品。特別是一些關鍵質(zhì)量屬性（Critical Quality Attributes, CQAs），它們將進一步影響藥物的臨床效果。因此，高可信度地識別 CQAs，并對藥物生產(chǎn)過程導致這些CQAs含量水平變化的過程和條件監(jiān)控，可以幫助提升藥物的安全性和有效性。以信使RNA（messenger RNA，mRNA）疫苗為代表性的寡核苷酸生物制品在新型冠狀病毒席卷全球的過去幾年間取得飛速發(fā)展1 。被賦予了快速“通行證”的全球第一款mRNA疫苗，BioNTech和輝瑞公司開發(fā)的BNT162b2產(chǎn)品2 的上市，代表全球的mRNA疫苗正式從研究階段進入商用。盡管整個周期縮短，但與疫苗的安全性和有效性相關的CQAs依然經(jīng)過了監(jiān) 管部門的表征和監(jiān)控。與此同時，其他寡核苷酸生物制品，如質(zhì)粒DNA（plasmid DNA，pDNA）、反義寡核苷酸（antisense oligonucleotide，ASO）3 、小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）4 等寡核苷酸藥物的表征也獲得了豐富經(jīng)驗。其中，基于高分辨質(zhì)譜的液相色譜-高分辨質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）技術也成為寡核苷酸深入表征的重要手段，應用于寡核苷酸藥物從發(fā)現(xiàn)、開發(fā)到質(zhì)量控制（Quality Control，QC）的各個階段，充分地遵循和詮釋了“質(zhì)量源于設計”的概念，通過加強過程設計和控制，提高開發(fā)和生產(chǎn)的效率。多質(zhì)量屬性監(jiān)測代表了一種優(yōu)化的分析解決方案5 ，專注于深入表征生物制品的關鍵質(zhì)量屬性，有望以單個LC-MS 實驗來取代多個傳統(tǒng)的 QC 放行和穩(wěn)定性測試方法（包括傳統(tǒng)電泳和色譜方法）6 。本文開發(fā)了一整套從前端Orbitrap Exploris 120質(zhì)譜儀到后端Orbitrap Exploris MX質(zhì)量分析器的分析流程，由合規(guī)的Chromeleon軟件控制，成功用于修飾核酸樣品的多質(zhì)量屬性監(jiān)測。