中藥材分析用樣品制備方法介紹
(1)超聲提取法
超聲波具有助溶作用,因此可用于樣品中待測組分的提取。超聲提取較冷法速度快,一般僅需數十分鐘即可達到平衡。超聲提取過程中溶劑可能會有一定的損失,所以進行含量測定時,應于超聲振蕩前先稱定重量,提取完畢后,放冷至室溫,再稱重,并補足減失的重量,濾過,取續(xù)濾液備用。
超聲提取法簡便,不需加熱,提取時間短,適用于固體制劑中待測組分的提取。應用于藥材粉末的提取時,由于提取組分是由細胞內逐步散出來,速度較慢,加溶劑后先放置一段時間,再進行超聲震蕩提取。
(2)回流提取法
回流提取法是將樣品粉末置燒瓶中,加入一定量的有機溶劑,加熱進行回流提取的方法。在加熱條件下組分溶解度增大,溶出速率加快,有利于提取?；亓魈崛》ㄖ饕糜诠腆w制劑的提取。提取前應將樣品粉碎成細粉,以利于組分提出。提取溶劑沸點不宜太高,對熱不穩(wěn)定或具有揮發(fā)性的組分不宜采用回流提取法提取?；亓魈崛》ㄌ崛∷俣瓤?但操作稍繁瑣。
(3)連續(xù)回流提取法
連續(xù)回流提取法適用索氏提取器連續(xù)進行提取,操作簡便,節(jié)省溶劑,蒸發(fā)的溶劑經冷凝流回樣品管,因其中不含待測組分,所以提取效率高。本法應該選用低沸點的溶劑,如乙醇、甲醇等,提取組分對熱應穩(wěn)定。
(4)萃取法
萃取法是利用溶質在兩種互不相溶的溶劑中溶解度不同,使物質從一種溶劑轉移到另一種溶劑中,經過多次萃取,將測定組分提取出來的方法。萃取法主要用于液體制劑中待測組分的提取分離。
萃取用溶劑應根據待測組分的溶解性來選擇。待測組分應在其中溶解度大,而雜質應在其中溶解度小。溶質在有機相和水相的分配比越大,萃取效率越高。根據相似相容原理,極性較強的有機溶劑正丁醇等適用于提取皂苷類成分,乙酸乙酯多用于提取黃酮類成分,三氯甲烷分子中的氫可于生物堿形成氫鍵,多用于提取生物堿類成分,揮發(fā)油等非極性組分則宜用非極性溶劑乙醚、石油醚等提取。
水相的pH值可影響弱酸弱堿性物質在兩相的分配。酸性組分提取的pH值一般應比其pKa低1～2個pH單位,堿性組分提取的pH值則應比其pKa高1～2個pH單位。
酒劑和酊劑在萃取前應先揮去乙醇,否則乙醇可使有機溶劑部分或全部溶解于水中。
(5)水蒸氣蒸餾法
部分具有揮發(fā)性并可隨水蒸氣蒸餾出的組分,可采用水蒸氣蒸餾法提取,收集餾出液供分析使用。揮發(fā)油、一些小分子的生物堿如麻黃堿、檳榔堿,某些酚類化合物如丹皮酚等可以采用本法提取。用本法提取的組分對熱應穩(wěn)定。
(6)超臨界流體萃取法
超臨界流體是指當壓力和溫度達到物質的臨界點時,所形成的單一相態(tài),如CO2的臨界溫度為31℃,臨界壓力為7390kPa,當壓力和溫度超過此臨界點的時,CO2便成為超臨界流體。
最常使用的超臨界流體是CO2,因為CO2具有較低的臨界溫度和臨界壓力,同時還具有惰性、無毒、純凈、價格低廉等優(yōu)點。本法適合于中藥及其制劑中待測組分的提取分離,目前應用日益廣泛。
使用超臨界流體萃取儀提取時,將樣品置于萃取池中,萃取池應恒定在試驗溫度下,用泵將超臨界流體送入萃取池,萃取完畢后,再將溶液送入收集器中。
影響萃取的因素主要有溫度、壓力、改性劑和提取時間等。由于CO2為非極性化合物,因此超臨界CO2對極性組分的溶解性較差。在提取極性組分時,可在超臨界流體中加入適量的有機溶劑作為改性劑,如甲醇、三氯甲烷等。改性劑的種類可根據萃取組分的性質來選擇,加入量一般通過實驗來確定。
