雙抗體ELISA夾心法(Sandwich ELISA)的原理是將特異性抗體（捕獲抗體）結(jié)合到固相載體上形成固相抗體，然后加入待檢樣品，捕獲抗體與待檢樣品的的抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，洗滌后再加酶標(biāo)記抗體（檢測(cè)抗體），與免疫復(fù)合物中抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體-抗原-固相抗體復(fù)合物，加底物顯色后，即可判斷抗原含量，具有高靈敏度、高專一性，抗原無(wú)須事先純化的優(yōu)點(diǎn)。但捕獲抗體與檢測(cè)抗體必須精心選取，才可避免交叉反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位。
單克隆抗體對(duì)定制服務(wù)流程（該流程為一般流程，如客戶有特殊需求，可協(xié)商具體解決方案）：
階段一：抗原制備
公司準(zhǔn)備抗原，若客戶提供抗原，需10-15mg高純度蛋白質(zhì)；
階段二：?jiǎn)慰怪苽洌?-140天）
0-60天： 持續(xù)免疫5只 Balb/c小鼠，間接ELISA測(cè)定血清效價(jià)，至效價(jià)足夠高；
60-65天：融合小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞，獲得需要的雜交瘤細(xì)胞。
65-90天：間接ELISA篩選陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞并做亞克隆，提供10株陽(yáng)性細(xì)胞上清給客戶，供客戶篩選，所有陽(yáng)性克隆可保存2周左右。
90-120天：對(duì)客戶選出的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞做第二次亞克隆，保證細(xì)胞株的純度和穩(wěn)定性，如有必要可增加亞克隆次數(shù)。對(duì)篩選出的陽(yáng)性雜交瘤的單克隆抗體進(jìn)行亞型鑒定，擴(kuò)大培養(yǎng)客戶確認(rèn)的陽(yáng)性克隆細(xì)胞。
120-140天：將擴(kuò)大培養(yǎng)的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞制備腹水，并純化抗體1-2mg。
階段三：?jiǎn)慰古鋵?duì)（140-180天）
140-150天：對(duì)純化抗體做生物素或過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記，然后對(duì)標(biāo)記抗體進(jìn)行分子篩層析純化。
150-180天： 用棋盤(pán)式夾心ELISA篩選單克隆抗體對(duì)。未標(biāo)記的抗體做為捕獲抗體，標(biāo)記抗體做為檢測(cè)抗體，分組配對(duì)，做ELISA檢測(cè)。設(shè)置合適的陰性對(duì)照，加入標(biāo)準(zhǔn)抗原后OD值明顯升高的抗體對(duì)，即為配對(duì)抗體對(duì)。
階段四：產(chǎn)品交付（180-210天）
180-210天：制備以下產(chǎn)品并發(fā)貨：5mg捕獲抗體，1mg標(biāo)記的檢測(cè)抗體，2-5株雜交瘤細(xì)胞，抗體配對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)
單抗對(duì)定制價(jià)格
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