小分子抗體制備，合成具有良好免疫原性的人工抗原是制備抗體和建立免疫分析方法
服務(wù)簡(jiǎn)介
免疫分析法以其靈敏度高、特異性好、樣品通量大、檢測(cè)迅速和成本低廉的特點(diǎn)，在藥物殘留、環(huán)境污染物等小分子化合物檢測(cè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，合成具有良好免疫原性的人工抗原是制備抗體和建立免疫分析方法的前提和關(guān)鍵。
武漢金開瑞生物工程有限公司的小分子平臺(tái)專業(yè)從事食品安全、獸藥殘留、人類和動(dòng)物疾病診斷等領(lǐng)域小分子物質(zhì)完全抗原的設(shè)計(jì)、合成及抗體制備與試劑盒開發(fā)?？舍槍?duì)您的需求，改造或者合成小分子化合物的衍生物，提供不同連接臂的半抗原，不同載體蛋白的完全抗原；可提供半抗原衍生物，完全抗原的儀器鑒定結(jié)果，也可根據(jù)您的需求提供Balb/C小鼠免疫檢測(cè)結(jié)果；并提供相應(yīng)的小分子化合物的多克隆和單克隆抗體制備及試劑盒開發(fā)等一系列服務(wù)。
小分子抗體應(yīng)用
1. 小分子化合物的快速安全檢測(cè)
2. 食品安全檢測(cè)，如抗生素、違禁添加、藥物濫用等
3. 疾病相關(guān)的代謝中間體檢測(cè)，監(jiān)測(cè)血藥濃度
4. 毒品檢測(cè)，興奮劑檢測(cè)等
服務(wù)流程
接收訂單及樣品——需求分析——抗原合成——抗原鑒定——免疫——融合——篩選——腹水——單抗純化
客戶提供
金開瑞制備完全抗原：客戶需提供原料至少20 mg，純度不低于90%以及標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的CAS號(hào)；
客戶提供抗原：沒有明顯可見沉淀。
服務(wù)說明
服務(wù)說明
| 服務(wù)名稱 | 載體類型 | 交付結(jié)果 | 服務(wù)周期 |
|---|---|---|---|
| 半抗原改造 | / | 改造后的小分子衍生物L(fēng)C-MS的鑒定結(jié)果 | 3-4周 |
| 完全抗原制備 | 牛血清白蛋白 | 完全抗原SDS-PAGE、UV或MALDI-TOF鑒定結(jié)果 | 3-4周 |
| 卵清蛋白 | |||
| 鑰孔藍(lán)蛋白 | |||
| 人血清白蛋白 | |||
| 人-γ球蛋白 | |||
| 單克隆抗體的制備 | / | 免疫檢測(cè)結(jié)果，含ELISA的效價(jià)和特異性檢測(cè)結(jié)果 | 4-5個(gè)月 |
案例展示
小分子ELISA試劑盒開發(fā)
項(xiàng)目背景
客戶提供：藥物代謝分子**原料、標(biāo)準(zhǔn)品和ELISA檢測(cè)的陽性和陰性血清樣本。
客戶要求：
1、提供試劑盒所需的高靈敏度抗體（IC50≈1-2ppb）
2、提供ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線圖及標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍；
3、提供檢測(cè)樣本數(shù)據(jù)；
4、提供ELISA基本參數(shù)評(píng)價(jià)結(jié)果[LOD（最低檢測(cè)限）；批內(nèi)和批間變異系數(shù)；37℃加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)]；
5、定制的ELISA試劑盒成品（包被好的酶標(biāo)板及配套的試劑盒組分等。）
結(jié)果展示
藥物代謝分子**試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線各項(xiàng)參數(shù)
| Conc | OD1 | OD2 | Mean | SD | CV% | |
|---|---|---|---|---|---|---|
| BLK | 0 | 2.086 | 2.010 | 2.048 | 0.054 | 2.630 |
| STD1 | 0.025 | 1.811 | 1.802 | 1.806 | 0.007 | 0.360 |
| STD2 | 0.050 | 1.358 | 1.348 | 1.353 | 0.007 | 0.500 |
| STD3 | 0.100 | 0.943 | 0.971 | 0.957 | 0.020 | 2.080 |
| STD4 | 0.200 | 0.533 | 0.552 | 0.542 | 0.014 | 2.520 |
| STD5 | 0.500 | 0.298 | 0.297 | 0.297 | 0.000 | 0.140 |
| STD6 | 1.000 | 0.229 | 0.223 | 0.226 | 0.004 | 1.720 |
藥物代謝分子**試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合圖
項(xiàng)目小結(jié)
該項(xiàng)目歷經(jīng)5個(gè)月，最終開發(fā)出IC50=0.2ppb的單克隆抗體，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出客戶要求的1~2ppb，鑒于該抗體的高靈敏度，我公司直接建議客戶開發(fā)跟液相質(zhì)譜結(jié)果參照的高敏反應(yīng)試劑盒。（備注：由于樣本較難獲取，該項(xiàng)目歷時(shí)較長(zhǎng)，但研發(fā)成功的成品試劑盒各項(xiàng)數(shù)據(jù)參數(shù)均超出客戶的預(yù)期?。?/p>
小分子膠體金檢測(cè)卡開發(fā)
項(xiàng)目背景
客戶提供：***原料、標(biāo)準(zhǔn)品和膠體金檢測(cè)的陽性和陰性樣本以及該項(xiàng)目進(jìn)口膠體金檢測(cè)卡5份。
客戶要求：
1、提供膠體金所需的高靈敏度抗體；
2、提供合適的劃膜抗原濃度及金標(biāo)抗體濃度和相應(yīng)的稀釋液，及相應(yīng)的試紙條的標(biāo)準(zhǔn)品消線濃度；
3、提供檢測(cè)樣本數(shù)據(jù)；
4、提供膠體金基本參數(shù)評(píng)價(jià)結(jié)果[LOD（最低檢測(cè)限）；交叉反應(yīng)率；加速穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；均一性]；
5、定制的膠體金成品（檢測(cè)卡及配套的組分等）。
結(jié)果展示
1、抗體靈敏度及特異性：
線性相關(guān)系數(shù)R2≥0.98；IC50：0.369±0.05ppb；與其他小分子交叉率均 <0.1%
| 校準(zhǔn)品 | ***小分子 | 校準(zhǔn)品 | 小分子1 | 小分子2 | 小分子3 | 小分子4 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| OD | OD | OD | OD | OD | ||
| 0 | 2.601 | 0 | 2.609 | 2.672 | 2.672 | 2.734 |
| 0.025 | 2.217 | 0.5 | 2.754 | 2.719 | 2.594 | 2.742 |
| 0.075 | 2.028 | 2.5 | 2.598 | 2.591 | 2.508 | 2.557 |
| 0.225 | 1.644 | 5 | 2.635 | 2.51 | 2.603 | 2.709 |
| 0.675 | 0.869 | 10 | 2.793 | 2.782 | 2.771 | 2.937 |
| 2.025 | 0.276 | 50 | 2.742 | 2.826 | 2.64 | 2.859 |
| 100 | 2.609 | 2.586 | 2.476 | 2.641 | ||
| R2 | 0.988 | |||||
| IC50 | 0.369 |
2、膠體金檢測(cè)卡成品：
2.1 劃膜條件
T線：***小分子-BSA 劃膜濃度：0.5mg/ml
C線：羊抗鼠IgG(5.0mg/ml 劃膜濃度：0.6mg/ml
2.2 金標(biāo)抗體
***小分子（42-7）單抗 (原始濃度：1.0mg/ml),標(biāo)記后濃度：4ug/ml
2.3 結(jié)論
陰性C、T線正常； 陽性（100ul純水添加1ppb***小分子）C線正常，T線消線。
項(xiàng)目小結(jié)
該項(xiàng)目歷經(jīng)11個(gè)月，最終開發(fā)出1ppb可消線的膠體金檢測(cè)卡，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出客戶的預(yù)期，鑒于該膠體金的靈敏度，客戶與我公司建立了后期大量開發(fā)的協(xié)議，建立了良好的合作關(guān)系。（備注：由于樣本較難獲取，項(xiàng)目歷時(shí)較長(zhǎng)，但研發(fā)成功的成品膠體金檢測(cè)卡各項(xiàng)數(shù)據(jù)參數(shù)均超出客戶的預(yù)期?。?/p>
小分子膠體金檢測(cè)卡開發(fā)
小分子A單克隆抗體
1. 零值OD值：1.8-2.1；
2. 靈敏度（0.05ppb B/B0）：90%～80%；
3. 4.05ppb B/B0：<10%；
4. 線性相關(guān)系數(shù)R2≥0.99；IC50：0.16±0.01ppb；
5. 交叉反應(yīng)率：小分子A與小分子1、2、3的交叉反應(yīng)率均小于1%
| 校準(zhǔn)品（ppb） | ** | 校準(zhǔn)品（ppb） | 小分子1 | 小分子2 | 小分子3 |
|---|---|---|---|---|---|
| OD | OD | OD | OD | ||
| 0 | 2.102 | 0 | 2.2816 | 1.9292 | 1.8454 |
| 2.042 | 2.1895 | 1.594 | 2.0306 | ||
| 0.05 | 1.713 | 2.5 | 2.5427 | 2.4528 | 2.4111 |
| 1.706 | 2.4342 | 2.3541 | 2.3565 | ||
| 0.15 | 1.089 | 5 | 2.4364 | 2.4755 | 2.4502 |
| 0.5 | 0.546 | 10 | 1.4292 | 1.3749 | 1.9973 |
| 1 | 0.413 | 20 | 2.3306 | 1.9765 | 2.0693 |
| 2 | 0.3015 | 40 | 2.1805 | 1.9356 | 1.7221 |
| R2 | 0.99807 | ||||
| IC50 | 0.168 |
小分子B單克隆抗體
1. 零值OD值：1.8-2.0；
2. 靈敏度（0.025ppb B/B0）：90%～80%；
3. 2.025ppb B/B0：<10%；<10%；
4. 線性相關(guān)系數(shù)R2≥0.99；IC50：0.2±0.05ppb；
5. 交叉反應(yīng)率：小分子B與小分子1、2、3、4、5、6、7、8的交叉反應(yīng)率均小于1%
| 校準(zhǔn)品 | 小分子B | 校準(zhǔn)品 | 小分子1 | 小分子2 | 小分子3 | 小分子4 | 小分子5 | 小分子6 | 小分子7 | 小分子8 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| OD | OD | OD | OD | OD | OD | OD | OD | OD | ||
| 0 | 2.035 | 0 | 2.008 | 2.032 | 2.101 | 1.99 | 1.921 | 2.148 | 1.768 | 2.338 |
| 0.025 | 1.966 | 0.5 | 2.053 | 2.132 | 2.126 | 1.967 | 2.012 | 2.026 | 1.913 | 2.169 |
| 0.075 | 1.49 | 2.5 | 2.172 | 2.09 | 2.079 | 1.968 | 1.933 | 1.832 | 2.165 | 2.183 |
| 0.225 | 0.985 | 5 | 2.025 | 2.161 | 2.009 | 2.12 | 1.8 | 1.885 | 1.827 | 2.282 |
| 0.675 | 0.491 | 10 | 2.09 | 2.232 | 2.159 | 1.992 | 2.021 | 2.05 | 1.115 | 2.211 |
| 2.025 | 0.164 | 50 | 1.963 | 2.158 | 2.239 | 2.054 | 2.158 | 1.658 | 1.338 | 2.275 |
| 100 | 1.746 | 2.238 | 2.168 | 2.115 | 2.098 | 1.949 | 2.185 | 2.47 | ||
| R2 | 0.98855 | |||||||||
| IC50 | 0.21157 |
小分子抗體定制價(jià)格
小分子抗體定制信息由武漢金開瑞生物工程有限公司為您提供，如您想了解更多關(guān)于小分子抗體定制報(bào)價(jià)、型號(hào)、參數(shù)等信息，歡迎來電或留言咨詢。
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