一. 定性分析

　　選擇合適的溶劑(非極性)，使用有足夠純度單色光的分光光度計，在相同的條件下測定相近濃度的待測試樣和標(biāo)準(zhǔn)品的溶液的吸收光譜，然后比較二者吸收光譜特征：吸收峰數(shù)目及位置、吸收谷及肩峰所在的位置( l )等;分子結(jié)構(gòu)相同的化合物應(yīng)有完全相同的吸收光譜。

　　二. 定量分析

　　(一)單組分定量分析方法

　　1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法：配制一系列(5~10)個不同c的標(biāo)準(zhǔn)溶液 ，在適當(dāng)l —— 通常為 lmax下，以適當(dāng)?shù)目瞻兹芤鹤鲄⒈龋謩e測定A，然后作 A-c 曲線同條件下測定試樣溶液吸光度 Ax ，查找對應(yīng)的 cx 。

　　2. 直接比較法：已知試樣溶液基本組成，配制相同基體、相近濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別測定吸光度A標(biāo)、A樣

　　根據(jù) L-A 定律： A標(biāo) = K · b · c標(biāo) A樣 = K · b · c樣

　　則

　　(18)

　　(二)多組分定量分析

　　混合組分的吸收光譜相互重疊的情況不同，測定方法也不相同，常見混合組分吸收光譜相干擾情況有以下三種：

　　圖5 混合組分吸收光譜的三種相干情況示意圖

　　1.第一種情況：各種吸光物質(zhì)吸收曲線不相互重疊或很少重疊，則可分別在l1 及 l2 處測定 a 及 b 組分的 c;

　　2. 第二種情況 部分重疊：先在 l1 處測得 ca ,再在 l2 處測得混合組分的吸光度 Aa+b ，根據(jù)吸收定律加和性：

　　即可求得cb。[應(yīng)先求得 ea(l2 ) ，與 ea(l2 ) ，并使用相同 b ]

　　3. 第三種情況:兩吸收曲線互相重疊，但服從 L-B 定律

　　(1) 解方程組法：

　　若試樣中需要測定兩種組分，則選定兩個波長l1 及 l2 ，測得試液的吸光度為 A1和 A2，則可解方程組求得組分a、b 的濃度ca、cb ：

　　如果混合物含有 n 個組分，可不經(jīng)分離，在 n 個適當(dāng)波長處進行 n 次測量，獲得 n個吸光度值，然后解 n 個聯(lián)立方程以求得各組分的濃度。

　　(2)等吸光度雙波長(消去)法

　　吸收光譜重疊的 d、e 兩組分共存，現(xiàn)設(shè)法把一種組分(a)的吸光度消去。方法如下：

　　圖6 二組分混合物吸收光譜用作圖法選擇l1、l2(雙波長分光光度法)

　　選取兩個適當(dāng)?shù)牟ㄩLl1 和 l2 ，

　　使 e1d= e2d ，而

　　盡可能大，則用這兩個波長l1 和 l2測得混合物溶液吸光度之差 ?A 應(yīng)只與 ce 成正比(而與cd無關(guān))，直接測得ce ：

　　因為

　　所以

　　若用 1cm 吸收池

　　

　　若需測定另一組分 d 時，也可用同樣方法，選擇另一個l1’ 和 l2’ ，先消去的 e 的干擾，直接求cd